湿法装柱:一般是将树脂装至柱高的三分之二处，用水进行反洗，使树脂松散，展开，将树脂的微细粉末及一些机械杂质去除。然后放出水，至水面略高于树脂的层面，接着用酒精以适当的流速淋洗，至流出的酒精中无油溶性杂质为止，后用水洗出酒精即可使用，这样可以洗去小分子有机物。
吸附层析流动相选择:考虑被分离物质性质，层析泵，吸附剂的活性，展开剂的极性。
分配层析法:基于混合物各组分在固定相与流动相之间的分配性质不同而实施的一种层析方法。原理:当一种溶质分布在两个互不相容的溶剂中时，它在固定相和流动相两相内的的浓度之比是个常数，成为分配系数。
分配层析分离各种不同的化合物的本质是化合物在两相中的分配系数因为化合物结构不同而产生分配系数的差异。
分配层析在支持物上形成部分互溶的两相系统。一般是水相和有机溶1剂相。常用支持物是硅胶、纤维素和淀粉等，这些亲水物质能储留相当量的水。被分离物质在两相中都能溶解，但分配比率不同，展层时就会形成以不同速度向前移动的区带。
离子交换层析支持物是人工交联的带有能解离基团的有机高分子，如离子交换树脂、离子交换纤维素、离子交换凝胶等。带阳离子基团的，如磺酸基（—SO3H）、羧（—CH2COOH）和磷酸基等为阳离子交换剂。带阴离子基团的，如DEAE—（二胺）和QAE—（四级胺）等为阴离子交换剂。离子交换层析只适用于能在水中解离的化合物，包括有机物和无机物。对于蛋白质、核酸、氨基酸及核苷酸的分离分析有的分辨力。离子交换基团在水溶液中解离后，能吸引水中被分离物的离子，各种物质在离子交换剂上的离子浓度与周围溶液的离子浓度保持平衡状态，各种离子有不同的交换常数，K值愈高，被吸附愈牢。洗脱时，增加溶液的离子强度，如改变pH，增加盐浓度，离子被取代而解吸下来。洗脱过程中，按K值不同，分成不同的区带。
分配层析分离各种不同的化合物的本质是化合物在两相中的分配系数因为化合物结构不同而产生分配系数的差异。分配层析中纸层析滤纸选择: -般选择中速滤纸，以正J醇做展开剂，展开速度慢。以石油1醚做展开剂展开速度快。
离子交换层析:是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行的一种层析方法。原理:依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。固定相是离子交换剂，由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过-定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成。
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